稀釋法測定最小抑菌濃度(MIC)是一種評估抗菌劑抑制微生物生長能力的實驗技術(shù),主要包括微量稀釋法和常量肉湯稀釋法兩種方法。瓊脂稀釋法具有操作簡便、成本低廉、適合高通量篩選等優(yōu)勢,尤其適合自動化操作和精確控制藥物濃度。肉湯稀釋法直觀、易于操作,適合實驗室規(guī)模的測試,并且可以根據(jù)實驗需求調(diào)整藥物濃度和培養(yǎng)基體積。
細胞免疫熒光(Immunofluorescence,IF)是一種常用的技術(shù),用于檢測細胞內(nèi)特定蛋白質(zhì)或其他分子的分布和表達情況。分析細胞免疫熒光的結(jié)果涉及多個步驟,包括圖像采集、圖像處理、定量分析和數(shù)據(jù)解釋。
菌種保藏(culture preservation,culture collection)是保持微生物菌株活力和遺傳性狀的關(guān)鍵技術(shù)。在分子生物學研究中,經(jīng)過基因編輯或改造的菌種通常非常珍貴且微量,因此需要進行妥善的保藏。以下是具體的操作步驟:
在一無菌的Erlenmeyer或baffle瓶中,用新鮮預熱的培養(yǎng)液按I1:100的比例稀釋過夜培養(yǎng)物,燒瓶的體積應(yīng)該是培養(yǎng)液體積的5倍以上。如果不搖動培養(yǎng),所用燒瓶的體積應(yīng)比培養(yǎng)液體積大20倍以上,以確保足夠的通氣。
具酸或堿性基團的有機物質(zhì),在不同ph值時,其結(jié)構(gòu)可能發(fā)生變化,因而熒光強度將發(fā)生改變;對無機熒光物質(zhì),因ph值會影響其穩(wěn)定性,因而也可使其熒光強度發(fā)生改變。
在進行這些實驗之前,建議仔細閱讀相關(guān)文獻、優(yōu)化實驗條件,并進行必要的質(zhì)控步驟,以確保獲得高質(zhì)量的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株。
固定液的種類很多,用時可查閱制片方面的書籍。首先要根據(jù)實驗目的,選用固定液。但應(yīng)用時必須首先了解各種混合固定液中的組成成分能否預先混合,固定后是否需要洗滌,然后再開始配制固定液。