WB實驗中使用到的有三種抗體：一抗、二抗和內(nèi)參抗體。一抗是唯一針對目標(biāo)抗原的抗體，可以進(jìn)行制備也可以購買現(xiàn)貨，難度系數(shù)較高；二抗直接買就OK，只是需要留意下種屬選擇；內(nèi)參抗體必不可少，是WB實驗中的質(zhì)控環(huán)節(jié)。
抗體和重組蛋白無論是保存還是運輸，請避免反復(fù)凍融。反復(fù)凍融，冰晶會破壞抗體和重組蛋白的空間結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致蛋白變性形成多聚體和重組蛋白構(gòu)象改變，從而降低抗體的結(jié)合能力，也加快了抗體球蛋白和重組蛋白的降解速度。抗體和重組蛋白保存得當(dāng)與否，直接決定了抗體和重組蛋白的活性使用效果，如果保存得當(dāng)，抗體和重組蛋白活性大部分都可以維持?jǐn)?shù)年。
PBS緩沖液是一種廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)實驗中的緩沖溶液，它的全稱是Phosphate Buffer Saline (PB)，中文通常稱為"磷酸鹽緩沖鹽溶液"或者"磷酸鹽緩沖生理鹽水"。這種溶液之所以能夠保持穩(wěn)定的pH值，主要得益于其中的磷酸緩沖對（H2PO4-和HPO42-）。
白細(xì)胞介素，簡稱白介素，是指在白細(xì)胞或免疫細(xì)胞間相互作用的淋巴因子，它和血細(xì)胞生長因子同屬細(xì)胞因子。兩者相互協(xié)調(diào)，相互作用，共同完成造血和免疫調(diào)節(jié)功能。白細(xì)胞介素在傳遞信息，激活與調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞，介導(dǎo)T、B細(xì)胞活化、增殖與分化及在炎癥反應(yīng)中起重要作用。
流式細(xì)胞術(shù)廣泛應(yīng)用于細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)分子表達(dá)特征的分析，界定不同種類的細(xì)胞群，測定分離出的亞類純度，分析細(xì)胞的大小和總量，它可以同時分析單個細(xì)胞的多個參數(shù)。它主要用于檢測標(biāo)記在抗體上的熒光強度，這些熒光抗體則可以檢測與特定細(xì)胞分子結(jié)合的蛋白或配體，如與 DNA 結(jié)合的溴化丙啶 (PI) 等。
當(dāng)一瓶細(xì)胞裝滿后，進(jìn)行正常處理。 將它均勻地吹進(jìn)培養(yǎng)瓶中，然后鋪上6孔板，每孔2ml。 涂抹后，不用觀察直接用酒精棉擦拭，然后放入培養(yǎng)箱中。 稍微向左三圈，向右三圈，先三圈，然后三圈。基本上，24小時后，每個孔中的細(xì)胞將非常均勻。
在免疫組化反應(yīng)中最重要，包括孵育時間和抗體濃度。一抗孵育溫度有幾種：4℃、室溫、37℃，其中4℃效果最佳；孵育時間：這與溫度、抗體濃度有關(guān)，一般37℃1-2h，而4℃過夜和從冰箱拿出后37℃復(fù)溫45min。具體條件還要摸索。
判斷感受態(tài)細(xì)胞制備的優(yōu)劣主要是通過轉(zhuǎn)化效率來檢測。經(jīng)轉(zhuǎn)化外源質(zhì)粒DNA的大腸桿菌在含抗性的LB平板過夜培養(yǎng)后，平板上長滿克隆且陰性對照（未轉(zhuǎn)入外源DNA的感受態(tài)）沒有克隆，證明感受態(tài)細(xì)胞制備良好。
